高速RT-PCR法检测手足口病肠道病毒效果评价

doi:10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2018.08.029

预防医学

2018, Vol. 30

Issue (8): 858-860 DOI: 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2018.08.029

实验技术

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高速RT-PCR法检测手足口病肠道病毒效果评价

高蕾，楼永良

温州医科大学检验医学院生命科学学院，浙江温州 325035

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摘要目的建立高速反转录PCR（RT-PCR）法，并探讨其在手足口病肠道病毒检测中的应用前景。方法采用SpeedStar HS DNA polymerase和HiScript II Reverse Transcriptase建立高速RT-PCR法，采用高速RT-PCR法和常规试剂盒法对不同浓度肠道病毒阳性基因标准品和112份手足口病核酸阳性样本进行检测，比较两种方法检测结果差异。结果高速RT-PCR法和常规试剂盒法整个PCR扩增时间分别为54和96 min。高速RT-PCR法的最低检出限为105拷贝/μL，常规试剂盒法的最低检出限为为106拷贝/μL；高速RT-PCR法的扩增效率为106.67%，高于常规试剂盒法的102.12%；两种方法的检测结果具有高度一致性（Kappa=0.755，P<0.05）。高速RT-PCR法的批内变异系数为0.88%~1.37%，批间变异系数为1.04%~2.95%。结论所建立的高速RT-PCR法具有良好的检测效率、灵敏度、重复性和稳定性，适用于手足口病肠道病毒核酸快速检测。

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	高蕾，楼永良

关键词 ：手足口病, 肠道病毒, 高速PCR, RT-PCR

出版日期: 2018-07-25

中图分类号:

R446.5

通信作者: 楼永良，E-mail：louyongliang2013@163.com

作者简介: 高蕾，本科，主管检验师，主要从事微生物检验工作

引用本文:

高蕾，楼永良. 高速RT-PCR法检测手足口病肠道病毒效果评价[J]. 预防医学, 2018, 30(8): 858-860.

链接本文:

http://www.zjyfyxzz.com/CN/Y2018/V30/I8/858

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