联合环介导等温扩增技术和横向流动试纸条检测金黄色葡萄球菌

doi:10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2019.04.025

预防医学

2019, Vol. 31

Issue (4): 423-425,429 DOI: 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2019.04.025

实验技术

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联合环介导等温扩增技术和横向流动试纸条检测金黄色葡萄球菌

陈欢¹, 余蓓蓓², 黄世旺³, 徐昌平⁴, 毛争争¹

1.台州市椒江区疾病预防控制中心,浙江台州 318000;
2.浙江大学医学院附属邵逸夫医院;
3.杭州市江干区疾病预防控制中心;
4.浙江省疾病预防控制中心

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摘要目的应用环介导等温扩增技术（LAMP）和横向流动试纸条检测技术（LFD）联合检测金黄色葡萄球菌。方法从GenBank数据库下载多条金黄色葡萄球菌nuc基因序列,在其保守区域设计LAMP引物,建立LAMP-LFD恒温扩增快速检测技术;优化反应温度和体系后通过检测多种病原菌验证检测特异度和灵敏度,并比较LAMP-LFD和荧光PCR法的检测效果。结果 LAMP-LFD在最佳反应温度60 ℃条件下检测金黄色葡萄球菌具有高特异度,构建的阳性质粒DNA灵敏度达到1.0×10¹ copies/μL。LAMP-LFD和荧光PCR法检测12份临床标本的阳性率均为75.00%;LAMP-LFD检测时间为35 min,而荧光PCR法约为1 h。结论 LAMP-LFD有灵敏度高、检测时间短等特点,可应用于金黄色葡萄球菌快速检测。

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关键词 ：金黄色葡萄球菌, 环介导等温扩增技术, 横向流动试纸条

收稿日期: 2018-10-29 修回日期: 2018-12-26 出版日期: 2019-04-02

中图分类号:

R372

基金资助:台州市椒江区科技计划项目（172063）

通信作者: 陈欢,E-mail：1204119187@qq.com

作者简介: 陈欢,本科,副主任技师,主要从事实验室管理和微生物检验工作

引用本文:

陈欢, 余蓓蓓, 黄世旺, 徐昌平, 毛争争. 联合环介导等温扩增技术和横向流动试纸条检测金黄色葡萄球菌[J]. 预防医学, 2019, 31(4): 423-425,429.

链接本文:

http://www.zjyfyxzz.com/CN/Y2019/V31/I4/423

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