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邻苯二甲酸二丁酯降解菌L6关键基因扩增及代谢产物分析 |
吕沈聪, 王恒辉, 燕勇, 管健
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嘉兴市疾病预防控制中心,浙江 嘉兴 314050 |
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摘要 目的 通过扩增邻苯二甲酸二丁酯(DBP)降解菌L6的关键基因并分析代谢产物,了解该菌株的降解机制.方法 以DBP降解菌L6基因组为模板,PCR扩增邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,PCR产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测,再进行测序和分析;将DBP降解菌L6接种于含DBP浓度为800 mg/L的基础培养基中培养120 h,采用超高效液相色谱法(UPLC)和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测培养基中的残留物质,确定降解产物.结果 通过PCR扩增成功获得DBP降解菌L6的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,经NCBI比对发现,分别与甲基杆菌属菌株arboreus clone SY117(Accession No. KM041246.1)的邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因具有较高的相似性。L6培养基中尚残留部分DBP,浓度为135 mg/L;0.7 min时出现一个新的色谱峰,浓度为95.6 mg/L,经GC-MS确认该物质为邻苯二酚.结论 DBP降解菌L6的基因组内存在邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,与同属菌株arboreus clone SY117的基因有较高同源性,DBP降解菌L6降解DBP的产物为邻苯二酚。
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关键词 :
邻苯二甲酸二丁酯,
生物降解,
基因扩增,
邻苯二酚,
邻苯二甲酸双加氧酶,
邻苯二甲酸酯脱羧酶
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收稿日期: 2019-01-29
修回日期: 2019-04-10
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基金资助:嘉兴市科技计划项目(2016BY28056) |
通信作者:
吕沈聪,E-mail:thestorm2008@126.com
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作者简介: 吕沈聪,硕士,技师,主要从事微生物及理化检验工作 |
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