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预防医学  2021, Vol. 33 Issue (12): 1286-1289    DOI: 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2021.12.024
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应用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测白喉类毒素抗原
祝传顺1,2, 姚雷1,2, 周振发1,2, 洪禹1,2, 薛莹1,2, 朱卫华1,2, 杜琳1,2
1.北京智飞绿竹生物制药有限公司,北京 100176;
2.北京市细菌性疫苗工程技术研究中心
Quantitative determination of diphtheria toxoid antigen by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay
ZHU Chuanshun, YAO Lei, ZHOU Zhenfa, et al
全文: PDF(987 KB)  
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 目的 对定量检测白喉类毒素(DT)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)进行方法学验证并初步应用。方法 以白喉抗毒素(DA)为包被抗体,大鼠抗DT抗体为检测抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗大鼠IgG抗体为酶标抗体检测DT抗原的含量,对双抗体夹心ELISA进行方法学验证。结果 DT抗原含量在0~0.125 Lf/mL范围内反应曲线线性关系良好(r=0.996),8次重复实验的r值为0.995~0.997。该方法与破伤风类毒素(TT)抗原、百日咳类毒素(PT)抗原、百日咳丝状血凝素(FHA)抗原和百日咳黏附素(PRN)抗原无明显交叉反应,特异性较好。精密度验证变异系数为1.445%~4.431%,准确度验证回收率为91.86%~105.47%,准确检测范围为0.001 953 125 Lf/mL~0.125 Lf/mL,定量限为0.001 953 125 Lf/mL。分别采用双抗体夹心ELISA和絮状单位测定法测定6批类毒素原液中DT抗原的含量,结果显示2种检测方法呈高度相关(r=0.974),检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 双抗体夹心ELISA灵敏度高,特异性强,能准确测定DT抗原的含量,可用于白喉疫苗生产工艺过程各阶段的抗原含量测定。
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关键词 白喉类毒素酶联免疫吸附法双抗体夹心    
收稿日期: 2021-07-14      修回日期: 2021-09-18      出版日期: 2021-12-10
中图分类号:  R517.1  
作者简介: 祝传顺,硕士,生物制药工程师,主要从事以百白破为基础的多联多价疫苗研发工作
通信作者: 姚雷,E-mail:yaolei@zhifeishengwu.com   
引用本文:   
祝传顺, 姚雷, 周振发, 洪禹, 薛莹, 朱卫华, 杜琳. 应用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测白喉类毒素抗原[J]. 预防医学, 2021, 33(12): 1286-1289.
ZHU Chuanshun, YAO Lei, ZHOU Zhenfa, et al. Quantitative determination of diphtheria toxoid antigen by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. Preventive Medicine, 2021, 33(12): 1286-1289.
链接本文:  
http://www.zjyfyxzz.com/CN/10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2021.12.024      或      http://www.zjyfyxzz.com/CN/Y2021/V33/I12/1286
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