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预防医学  2021, Vol. 33 Issue (12): 1286-1289    DOI: 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2021.12.024
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应用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测白喉类毒素抗原
祝传顺1,2, 姚雷1,2, 周振发1,2, 洪禹1,2, 薛莹1,2, 朱卫华1,2, 杜琳1,2
1.北京智飞绿竹生物制药有限公司,北京 100176;
2.北京市细菌性疫苗工程技术研究中心
全文: PDF(987 KB)  
输出: BibTeX | EndNote (RIS)      
摘要 目的 对定量检测白喉类毒素(DT)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)进行方法学验证并初步应用。方法 以白喉抗毒素(DA)为包被抗体,大鼠抗DT抗体为检测抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗大鼠IgG抗体为酶标抗体检测DT抗原的含量,对双抗体夹心ELISA进行方法学验证。结果 DT抗原含量在0~0.125 Lf/mL范围内反应曲线线性关系良好(r=0.996),8次重复实验的r值为0.995~0.997。该方法与破伤风类毒素(TT)抗原、百日咳类毒素(PT)抗原、百日咳丝状血凝素(FHA)抗原和百日咳黏附素(PRN)抗原无明显交叉反应,特异性较好。精密度验证变异系数为1.445%~4.431%,准确度验证回收率为91.86%~105.47%,准确检测范围为0.001 953 125 Lf/mL~0.125 Lf/mL,定量限为0.001 953 125 Lf/mL。分别采用双抗体夹心ELISA和絮状单位测定法测定6批类毒素原液中DT抗原的含量,结果显示2种检测方法呈高度相关(r=0.974),检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 双抗体夹心ELISA灵敏度高,特异性强,能准确测定DT抗原的含量,可用于白喉疫苗生产工艺过程各阶段的抗原含量测定。
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祝传顺
姚雷
周振发
洪禹
薛莹
朱卫华
杜琳
关键词 白喉类毒素酶联免疫吸附法双抗体夹心    
收稿日期: 2021-07-14      出版日期: 2021-12-03
ZTFLH:  R517.1  
通信作者: 姚雷,E-mail:yaolei@zhifeishengwu.com   
作者简介: 祝传顺,硕士,生物制药工程师,主要从事以百白破为基础的多联多价疫苗研发工作
引用本文:   
祝传顺, 姚雷, 周振发, 洪禹, 薛莹, 朱卫华, 杜琳. 应用双抗体夹心酶联免疫吸附法定量检测白喉类毒素抗原[J]. 预防医学, 2021, 33(12): 1286-1289.
链接本文:  
http://www.zjyfyxzz.com/CN/Y2021/V33/I12/1286
[1] 何思然,丁峥嵘.中国白喉的预防控制效果与免疫策略综述[J].中国疫苗和免疫,2017,23(6):711-715.
[2] 王真行,邹力,陈敏.WHO关于白喉疫苗的意见书[J].国际生物制品学杂志,2018,41(2):97-100.
[3] 张延龄,张晖.疫苗学[M].北京:科学出版社,2004:843-845.
[4] 中华人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国药典(三部)[S].北京:中国医药科技出版社,2020:581.
[5] 张霖阳,杨冰,王珣,等.白喉类毒素酶联免疫检测法的建立及初步应用[M].微生物学免疫学进展,2016,44(2):45-49.
[6] 谭亚军,夏德菊,李喆,等.白喉和破伤风类毒素抗原ELISA检测方法的建立[J].中国医药生物技术,2018,13(6):15-19.
[7] 陈雯,郑梦婷,胡业勤,等.联合疫苗中白喉类毒素抗原质量控制方法的研究[J].中国卫生检验杂志,2020,30(2):171-174.
[8] 潘殊男,肖詹蓉,史雨舟,等.百日咳丝状血凝素酶联免疫检测法的建立[J].微生物学免疫学进展,2012,40(4):25-28.
[9] 陈雯,雷念潮,周以斯,等.百日咳系列抗原的酶联免疫检测法建立及其在组分百日咳疫苗吸附原液中的应用[J].中国新药杂志,2021,30(7):601-606.
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