%A 潘晓东, 黄百芬, 蔡增轩, 王梦莉, 韩见龙, 陈苘 %T 虾过敏原蛋白质谱分析方法的酶解条件优化研究 %0 Journal Article %D 2021 %J 预防医学 %R 10.19485/j.cnki.issn2096-5087.2021.08.003 %P 768-771 %V 33 %N 8 %U {http://www.zjyfyxzz.com/CN/abstract/article_2100.shtml} %8 2021-08-10 %X 目的 优化虾过敏原蛋白质谱分析试验的胰蛋白酶酶解条件,提高质谱对虾过敏原蛋白的分析能力。方法 采用响应面试验设计对虾过敏原蛋白酶酶解的pH值、温度和时间进行优化,用胰蛋白酶消化肽段,经色谱分离后采用四极杆静电场轨道离子阱高分辨质谱测定,利用UniProt蛋白数据库和MaxQuant软件对过敏原蛋白进行鉴定和定量分析。结果 获得虾中2种过敏原蛋白,分别为原肌球蛋白和精氨酸激酶,质谱强度为100.2×106~436.5×106。响应面分析结果显示,酶解时间为4.29 h、温度为44.15 ℃、溶液pH值为6.55时,过敏原蛋白的质谱响应强度最高,为457.48×106。采用溶液pH值6.5、温度44 ℃、时间4.2 h进行验证试验,获得过敏原蛋白的平均响应强度为448.1×106,与预测值偏差为2.1%。结论 采用响应面法可以优化蛋白酶酶解条件,当pH值为6.5、温度为44 ℃、时间为4.2 h时具有最佳的酶解能力。